E-64reinst

(Epoxysuccinyl-L-leucylamido-(4-guanidino)butan, Expoxy[L-3-trans-carboxyoxiran-2-carbonyl]-L-Leu-agmatin)
C15H27N505Mr 357.4CAS [66701-25-5]

E-64 ist ein irreversibler und hochselektiver Cystein-(Thiol-)Protease-Inhibitor bei der Isolierung und Reinigung von Proteinen und Enzymen. Er hemmt die Calpain-Aktivierung.
Die Hemmung von Thiol-Proteasen durch E-64 scheint nicht-kompetitiver Natur zwischen den SH-Komponenten zu sein. Die trans-Epoxysuccinyl-Gruppe (aktiver Teil) von E-64 bindet irreversibel an eine aktive Thiol-Gruppe in vielen Cystein-Proteasen, wie Papain, Actinidase und Cathepsine B, H und L, um eine Thioether-Bindung zu bilden. E-64 hemmt keine Serinproteasen (außer Trypsin) wie andere Cysteinproteaseinhibitoren. Es reagiert nicht mit der funktionellen Thiolgruppe von Nicht-Protease-Enzymen.
E-64 kann als Ligand für die Affinitätsreinigung von Cysteinproteasen verwendet werden. Obwohl die Bindung des Inhibitors nicht mehr irreversibel ist, bleibt die Spezifität erhalten. Auswirkungen auf die Metastasenbildung in Mäusen (5).
Stammlösung: 1 mM wässrige Lösung
Arbeitslösung: 1 bis 10 μM
Wässrige Stammlösungen sind bei -20 °C über Monate stabil. Verdünnte Lösungen sind bei neutralem pH-Wert für Tage stabil. E-64 ist auch in DMSO löslich, eine 10 mM Lösung kann in trockenem DMSO hergestellt und bei -20 °C gelagert werden. Verdünnungen können in Kulturmedium oder in 0,9 % Natriumchlorid zur Injektion hergestellt werden.

Gehalt (HPLC)
min. 99,0 %


References:
  1. Hanada, K. et al. (1978) Agric. Biol. Chem. 42, 523, 529
  2. Varughese, K.J. et al. (1989) Biochemistry 28, 1330-2
  3. Nakao, H. et al. (1989) Int. J. Biochem. 21, 139-42
  4. Jani, J.P. et al. (1992) Oncol. Res. 4, 59-63
  5. Leto, G. et al. (1994) In Vivo 8, 231-6

HS: 29241900
Lagertemperatur: -15 °C to -25 °C

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