Sulforhodamin B Zytotoxizitäts-Assay1000 Reaktionen


Der Sulforhodamin B (SRB)- Zytotoxizitäts-Assay, entwickelt 1990, ist immer noch eine der am häufigsten angewendenten Methoden für das in vitro Zytotoxizitäts- Screening. Er basiert auf der Eigenschaft von SRB, an Protein-Komponenten von auf Zellkulturplatten fixierten Zellen zu binden. SRB ist ein leuchtend rosa Aminoxanthen-Farbstoff mit zwei Sulfongruppen, der unter milden sauren Bedingungen an basische Aminosäuren bindet. Unter basischen Bedingungen dissoziieren die Komplexe. Da die Bindung von SRB stöchiometrisch ist, ist die Menge des aus Zellen extrahierten Farbstoffes direkt proportional zur Zellmasse.
Der fixierte Farbstoff wird gelöst und bei OD 540 nm mit einem Referenzfilter von 690 nm photometrisch gemessen. Die OD-Werte korrelieren mit dem Gesamtproteingehalt und damit mit der Zellzahl.
Der Assay ist sensitiv, einfach durchzuführen, reproduzierbar und schneller bei besserer Linearität als die Formazan-basierten Assays. Er hat ein gutes Signal-zu-Hintergrund-Verhältnis und einen stabilen Endpunkt, der keine zeitabhängige Messung benötigt wie MTT oder XTT-Assays.

Inhalt: 0,4 g Sulforhodamin-Farbstoff, 2x 50 ml Fixierungs-Reagenz, 2x 50 ml 10x Wasch-Lösung, 4x 50 ml SRB Solubilisierungspuffer


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