Ni²⁺-IDA Metall-Chelat-Agaroseharz für die Affinitäts-Aufreinigung von poly-His-Tag-Proteinen. Agarose wurde sorgfältig mit Nickelionen via eines IDA-gekoppelten Liganden beladen. Die so entstandene stabile Affinitätsmatrix hat eine hohe Bindungskapazität für Histidinreste (bis zu 10 mg/ml, bestimmt mit einem klaren E. coli-Lysat). Andere Metall-Ionen wie Co²⁺, Cu²⁺ oder Zn²⁺ können ebenfalls eingesetzt werden und haben eigene zu den anderen Ionen jeweils unterschiedliche, Affinitäten.
Bei Bedarf kann das Nickelion durch 5 Waschschritte mit 100 mM EDTA von der Matrix entfernt und mit unterschiedlichen Metallionen wieder beladen werden.
Spezifikationen
Spezifität: Poly-His-Tag
Matrix: Agarose
Ligand: IDA
Bindungskapazität: 10 mg/ml
Körnung: 45 – 165 µm
Flussrate: 0,25 – 2 ml/min
Maximaler Druck: 42 psi
Puffer-Kompatibilität: Übliche wässrige Puffer von pH 2 bis 12
Reinigungs-Puffer - Beispiele: 30 % Ethanol, 1 M NaOH, 0,01 M HCl, 8 M Harnstoff, 6 M Guanidiniumhydrochlorid
Lagerung: In Äquilibrierungspuffer bei 2 – 8 °C (Kurzzeitlagerung), in 20 % Ethanol bei 2 – 8 °C (Langzeitlagerung)