Ni²⁺-IDA Metall-Chelat-Agaroseharz für die Affinitäts-Aufreinigung von poly-His-Tag-Proteinen. Agarose wurde sorgfältig mit Nickelionen via eines IDA-gekoppelten Liganden beladen. Die so entstandene stabile Affinitätsmatrix hat eine hohe Bindungskapazität für Histidinreste (bis zu 10 mg/ml, bestimmt mit einem klaren E. coli-Lysat). Andere Metall-Ionen wie Co²⁺, Cu²⁺ oder Zn²⁺ können ebenfalls eingesetzt werden und haben eigene zu den anderen Ionen jeweils unterschiedliche, Affinitäten.

Bei Bedarf kann das Nickelion durch 5 Waschschritte mit 100 mM EDTA von der Matrix entfernt und mit unterschiedlichen Metallionen wieder beladen werden.

Spezifikationen

Spezifität: Poly-His-Tag

Matrix: Agarose

Ligand: IDA

Bindungskapazität: 10 mg/ml

Körnung: 45 – 165 µm

Flussrate: 0,25 – 2 ml/min

Maximaler Druck: 42 psi

Puffer-Kompatibilität: Übliche wässrige Puffer von pH 2 bis 12

Reinigungs-Puffer - Beispiele: 30 % Ethanol, 1 M NaOH, 0,01 M HCl, 8 M Harnstoff, 6 M Guanidiniumhydrochlorid

Lagerung: In Äquilibrierungspuffer bei 2 – 8 °C (Kurzzeitlagerung), in 20 % Ethanol bei 2 – 8 °C (Langzeitlagerung)