5-Brom-4-chlor-3-indolyl-β-D-galactosid (X-Gal)reinst

(X-Gal)
C14H15BrClNO6Mr 408.6CAS [7240-90-6]

Histochemisches Substrat für die Detektion des β-Galactosidase-Enzyms (1, 2, 3, 4, 9, 10). Nachweis von laf-Kolonien (8). X-Gal wird eingesetzt, um rekombinante Plasmide vom Parental-Vektor in Klonierungs-Experimenten mit lacZ- oder lacZ [DMvP1](-)Peptid-Genen enthaltenden Vektoren zu unterscheiden (2, 3, 5). Da X-Gal nach Hydrolyse ein unlösliches blaues Präzipitat ergibt, ist es äußerst gut verwendbar in Blotting- und ELISA-Assays sowie in der Immuncytochemie. Es wurde für den Nachweis coliformer Bakterien (E. coli) in der kommunalen Wasserversorgung (6) und in Lebensmitteln eingesetzt (7). X-Gal wird oft in Verbindung mit IPTG (Isopropyl-β-D-thiogalactopyranosid, Kat.-Nr. 26600) eingesetzt, das an den lac-Repressor bindet und diesen inhibiert, wodurch die β-Galactosidase-Aktivität induziert wird.
Stammlösung: 20 mg/ml in DMF. In Aliquots im Dunkeln bei -20 °C lagern. Konzentration für die Detektion von Transformanten: 40 µg/ml.

Reinheit (HPLC)
min. 99,0 %


References:
  1. Maloy, S.R. (1990) Experimental Techniques in Bacterial Genetics, Jones and Bartlett (eds.), Boston, MA
  2. Miller, J.H.(1992) A Short Course in Bacterial Genetic, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.
  3. Sambrook, J. et al. (1989) Molecular Cloning: A laboratory Manual, 2nd. ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor (4.8, 4.22-4.23, 4.33, 4.37-4.38, 1.85-1.86, B.14)
  4. Horowitz, J. et al. (1964) J. Med. Chem. 7, 574
  5. Brand, A. and Perrimon, N. (1993), Development 118, 401
  6. Ley, A. et al. (1993) Can. J. Microbio. 39, 821
  7. Feldsine, P.T. et al. (1993) J. AOAC Int. 76, 5
  8. Lojda, Z. et al. (1973) Histochemie 34, 31-9
  9. Lojda, Z. et al. (1979) in »Enzyme Histochemistry, A Laboratory Manual«, Springer-Verlag Berlin, Heidelberg, New York
  10. . Davies et al. (1980) Advanced Bacterial Genetics, Cold Spring Harbor, N.Y.
EINECS: 230-640-8WGK: 1HS: 29389090
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